泌尿器科における免疫学的研究

泌尿器科の患者に免疫グロブリンを割り当てることは、主治医が免疫系の障害の存在を前提とすることを意味する。細菌、ウイルス、真菌感染、アレルギー反応を複製する、全身性疾患は、シンドロームの数（感染、癌、アレルギー、自己免疫、リンパ増殖）によって特徴付けられるこれらの疾患の症状であることができます。1人の患者がいくつかの症候群を有することがある。例えば、慢性感染症（感染症）は、免疫不全を引き起こす可能性があり、免疫不全、感染症や癌（がん症候群）への素因を明らかにすることができます。感染症への移行は、リンパ増殖性疾患（例えば、白血病）の結果として発症した二次免疫不全のバックグラウンドに対して生じ得る。免疫系に病理学的変化の3つの主要なグループがある：

• 免疫不全状態の発症をもたらす免疫の1つまたは別の結合の定量的または機能的不全;
• 自己免疫プロセスの発達につながる、免疫系による抗原の認識における違反;
• アレルギー性疾患の発症により明らかにされる過反応性または「倒錯」免疫応答を含む。

免疫診断のスクリーニング（レベル1の試験）および適格性試験（2レベルの試験）がある。前者は、免疫システムの違反を修正するために存在し、後者は、さらなる免疫矯正のためにその実施に関わるメカニズムを確立するために存在する。

B-免疫の細胞間リンク

スクリーニング方法

• 免疫蛍光を介してBリンパ球の相対及び絶対数の決意またはB細胞抗原（CD19、CD20、前記CD - CD分類）に対するモノクローナル抗体を用いたフローサイトメトリー。Bリンパ球含有量は成人では正常であり、総白血球数の8〜19％または190〜380細胞/μlである。Bリンパ球レベルの上昇は、急性および慢性の細菌および真菌感染症、慢性肝疾患、全身性結合組織疾患、慢性リンパ球性白血病、骨髄腫で起こる。
• 単一放射状免疫拡散法、又はturbometrii比濁法、ラジオイムノアッセイまたは酵素免疫測定法（EIA）によって免疫グロブリンnespespetsificheskih（F、M、G、E）の濃度の決意。成人のための規範：免疫グロブリン（Ig）0.9-4.5g / l。IgM 03-3.7g / l。IgG 8.0-17g / l。免疫グロブリンの濃度の増加は、Bリンパ球の含有量の増加が生じるのと同じ病理学的状態で生じる。免疫グロブリンの濃度を低減することが先天性低ガンマグロブリン血症、免疫系の腫瘍、脾臓を除去し、タンパク質の損失、腎臓または腸の疾患において、細胞増殖抑制剤およびimmunodepreesantamiによる治療です。

メソッドの指定

• ポリエチレングリコールによる選択的沈降による血液中の循環免疫複合体の測定、続いて分光光度測定（通常80-20 UE）。循環免疫複合体の増加は、急性細菌、真菌、ウイルス感染、自己免疫、免疫複合体疾患、血清病、3型アレルギー反応、
• 放射免疫またはELISAによって細菌およびウイルス抗原に関連する血液中の特定の免疫グロブリン、自己免疫疾患におけるデオキシリボ核酸（DNA）、精子の識別（自己免疫性不妊症）およびprotivopochechnyh抗体（腎盂腎炎および糸球体腎炎）の決意。
• 精子中の精子中の抗精子抗体の定量[MAR-検定（混合抗グロブリン反応）]では、ノルムは負である。
• 腎盂腎炎と糸球体腎炎の鑑別診断のための尿中免疫グロブリン濃度の決定（蛋白尿の選択性）。
• ラジアル免疫拡散またはELISAによるアレルギー性前立腺炎の診断のための前立腺液汁中のIgEの測定。 
• B細胞マイトジェン（Tリンパ球の存在下でBリンパ球のblasttransformation反応の刺激のためのアメリカヤマゴボウのマイトジェン）でリンパ球Bの応答blasttransformation反応の研究、95から100パーセントの前記標準値。

免疫のT細胞リンク

スクリーニング方法

• 抗SDZモノクローナル抗体を用いた免疫蛍光法またはフローサイトフルオロメトリーによる成熟CD3 Tリンパ球反応の相対及び絶対数の決意。成人のための規範は58-76％または1100-1700細胞/μlです。Tリンパ球障害インジケータ細胞免疫の数を減らします。これは、いくつかの二次および主要な免疫不全の特徴である（慢性細菌やウイルス感染：結核、免疫不全症候群、癌、慢性腎不全、外傷、ストレス、加齢、栄養失調、細胞毒性薬による治療、電離放射線を買収しました）。Tリンパ球の数を増加させることは、免疫亢進またはリンパ球増殖性疾患の背景にあります。炎症では、Tリンパ球の数が最初に増加し、次いで減少する。T-リンパ球の減少の欠如は、炎症プロセスの慢性化を示唆している。
• リンパ球の亜集団の評価。
  • Tヘルパー（抗CD4抗体）の数の決定。通常、36〜55％または400〜1100細胞/μl。これらの細胞の数を増やすと、自己免疫疾患、ヴァルデンストレーム病、免疫賦活antitransplantatsionnogoに発生します。ヘルパーT細胞の数の減少は、電離放射線慢性細菌、ウイルス、原生動物感染、結核、後天性免疫不全症候群、悪性腫瘍、熱傷、外傷、栄養失調、老化、細胞増殖抑制剤の治療において起こります。
  • T-サプレッサー（抗CD4抗体）の数の決定。通常、17〜37％または300〜700細胞/μl。T-サプレッサーの数が増加するのは、T-ヘルパーの数が減少するのと同じ条件、およびT-ヘルパーの含量が上昇する同じ条件で減少することである。
  • 免疫調節指数CD4 / CD8、標準では1,5-2,5。2.5（アレルギー性疾患および自己免疫性疾患）以上の速度での多動性。低活動度 - 1.0未満（慢性感染症の素因）。炎症プロセスの開始時に、免疫調節指数が上昇し、それが降下すると正常化する。

メソッドの指定

• ナチュラルキラー（NK細胞） - 抗CD16抗体および抗CD56抗体の数の測定。CD16リンパ球のノルムは、6〜26％、CD56〜9〜19％である。ウイルス感染症では、癌、プライマリとセカンダリの免疫不全、火傷、外傷やストレス、細胞増殖抑制剤および電離放射線による治療 - NK細胞の数を増加させると、移植片拒絶、減少で起こります。 
• インターロイキン-2（活性化マーカー） - 抗CD25抗体に対する受容体を有するTリンパ球の数の測定。ノルムは10-15％です。その数の増加は、アレルギー性疾患、移植拒絶反応、急性期の一次感染における胸腺依存性抗原に対する応答、NK細胞の数が減少する同じ疾患の減少において観察される。
• 活性化マーカー - クラスII HLA-DRの組織適合性分子の発現の試験。発現の増加は、炎症過程、C型肝炎、セリアック病、梅毒、急性呼吸器感染症の患者において起こる。
• リンパ球のアポトーシスの評価。リンパ球アポトーシスの準備の指示が、ミトコンドリア及びBD-2癌原遺伝子における表面のFas受容体（CD95）の発現によって同定することができます。ヨウ化プロピジウム、初期アポトーシスに出現する細胞膜にホスファチジルセリンへの結合、DNAの断片およびアネキシンYに結合する：アポトーシスは、リンパ球処理二つの蛍光色素により評価しました。結果の評価はフローサイトメーターで行う。結果の計算は、様々な色素で染色された細胞の比に基づいています。Iアポトーシスの初期の兆候、ヨウ化プロピジウムおよびアネキシンと - - 唯一のヨウ化プロピジウム染色アポトーシスの後期の症状は、壊死を示し非染色細胞は、アネキシンYに関連した生細胞、です。
• インビトロでのTリンパ球の増殖の評価。
  • 細胞芽球形成の変化は、リンパ球の芽球変換の反応である。白血球は、植物起源の任意のマイトジェン（レクチン）とともにインキュベートされる。より一般的に使用されるphytohemagglutininは72時間、その後、塗抹標本を汚し、爆発の数を数える！刺激指数は、対照（フィトヘマグルチニンを含まない培養）における形質転換細胞のパーセンテージに対する実験（フィトヘマグルチニンとの培養）における形質転換細胞の割合の比である。リンパ球の爆破形質転換の反応は、細胞を分裂させるとDNA合成が増加するので、培養細胞に放射性標識（ZN-チミンジン）を含めることによって評価することができる。増殖応答の障害は、感染、腫瘍疾患、腎不全および外科的介入に関連する原発性および二次的免疫不全症の両方で起こる。
  • これらの研究の評価、活性化マーカー（CD25、トランスフェリンのレセプター - CD71）の発現をTリンパ球の休止に実質的に存在しない分子およびMHCクラスII HLA-DR、。Tリンパ球は、3日間の発現の活性化マーカーは、直接的または間接的免疫蛍光法により分析した後、モノクローナル抗体を分泌された受容体を用いたフローサイトメトリーフィトヘマグルチニンで刺激しました。
  • ラジオイムノアッセイまたはELISAにより活性化Tリンパ球[インターロイキン（IL）2、IL-4、IL-5、IL-6、ガンマ - インターフェロン、等]、により合成メディエーターの量を測定します。活性化された培養上清および細胞内のTHおよびTh2のマーカーとしてのγ-インターフェロンおよびIL-4の濃度の評価が特に重要である。可能であれば、産生細胞におけるマトリックスリボ核酸のレベルおよび対応するサイトカインに対する受容体の発現の強度によって、対応するサイトカインの遺伝子の発現を決定することは有用である。
    
• リンパ球の遊走阻害反応。因子を含む抗原を放出するリンホカインとの反応における感作Tリンパ球。リンパ球の遊走を阻害する。マイトジェンを細胞の培養物に導入すると、阻害の現象が観察される。阻害の程度を評価することにより、リンパ球がサイトカインを放出する能力を判断することが可能になる。通常、特定のマイトジェンに応じて、移動頻度は20〜80％である。
• NK細胞の細胞傷害性の評価。赤芽球系K-562の標的細胞を殺すナチュラルキラー細胞の能力を決定する。抗体依存性細胞傷害性が評価される場合、IgG抗体で被覆された標的細胞が使用される。標的細胞を3 H-ウリジンで標識し、エフェクター細胞と共にインキュベートする。標的細胞の死滅は、溶液中への放射性標識の放出から推定される。細胞傷害性の減少は、悪性新生物で起こる。ある場合には、インターロイキンによる治療の有効性の予後が必要とされる場合、NK細胞の細胞傷害性は、特定のサイトカインとともにインキュベートされた場合に評価される。

食細胞の機能の調査

スクリーニング方法

食細胞による微生物細胞の吸収（ラテックス粒子の貪食作用、ブドウ球菌、大腸菌の試験培養、または患者から単離された微生物）の調査。ヘパリン化血液を遠心分離することにより、白血球の懸濁液が単離され、IV血液型の血清がオプソニン化のために添加される（オプソニンは食作用を増強するタンパク質である）。微生物懸濁液を希釈し、白血球と混合し、120分間インキュベートし、インキュベーションの開始後30.90.120分後に分析のためにサンプリングする。選択された白血球懸濁液のうち、汚れが生じる。食作用の以下の指標を決定する：

• 貪食指数 - 30分および120分のインキュベーションで食作用に入った細胞のパーセンテージ; 貪食指数の規範値（30）貪食指数の94％（120）〜92％;
• 食細胞数 - 細胞内にある細菌の平均数。食細胞数（30）の規範値11％、貪食数（120）〜9.8％;  
• 食細胞数係数 - 食細胞数（30）対食細胞数（120）の比。通常1.16;
• 好中球の殺菌指数は、貪食細胞内で殺された微生物の数と吸収された微生物の総数との比である。66％のノルムである。

メソッドの指定

• ニトロシンテトラゾリウム（NST）による試験における食細胞の殺菌活性の調査は、NST試験である。白血球には、亜硝酸テトラゾリウムイエローの色素が添加される。色素が好中球に吸収されると、酸素のフリーラジカルの作用下で還元過程が起こり、青色の染色が生じる。反応は、96穴平底プレート中で行う。HCTと白血球との混合物を含む最初の3つのウェルでは、後者のラテックス粒子にハンクス溶液（自発性HCT）が添加される。37℃で25分間インキュベートする。結果を読み取り装置上で540nmで読み取り、従来の単位で表す。刺激なしのウェル中の平均光学濃度に対する刺激ウェル中の光学密度の比に等しい刺激因子（K _st）を計算する。健康な人では、_HCTは 90±45 UE、NST _Stim = 140±60 UEである。K _st = 1.78±0.36。
• 接着分子の調査。フローサイトメトリーの助けを借りて、表面抗原CD11a / CD18、CD11b / CD18、CD11c / CD18の発現を測定する。接着の侵害を伴う免疫不全は、感染の再発、創傷の治癒の遅れ、感染の病巣における膿の不在によって明らかになる。

補体系の検討

スクリーニング方法

補体の溶血活性の決定 - 補体活性化の古典的経路の研究。抗体で被覆したヒツジの赤血球に、患者の血清および健康な人の異なる希釈液を加える。溶血活性の単位は、赤血球の50％が破壊される血清の希釈の逆数として取られる。溶血の程度は、溶液中のヘモグロビンの収率によって測光的に評価される。補体の溶血活性の低下は、腎臓関与、急性糸球体腎炎を伴う全身性エリテマトーデスにおいて観察される。重症筋無力症、ウイルス性肝炎、リンパ腫、閉塞性黄疸を伴う増加、橋本甲状腺炎。リウマチ、関節リウマチ、結節性動脈周囲炎。皮膚筋炎、心筋梗塞、潰瘍性大腸炎、ライター症候群、痛風。

メソッドの指定

• 補体成分の決定。定量的測定は、放射状免疫拡散法および比濁分析法によって実施される。
  この研究は、補体成分の抗原性が変化しない限り、有益ではない。
• 補体のC1q成分は食作用を増強し、細胞毒性を媒介することが見出された。その減少は、免疫複合体、全身性エリテマトーデス、化膿性感染症および腫瘍の疾患において生じる。
• C3成分は、古典的補体経路および代替補体経路の活性化に関与する。その濃度の低下は、慢性細菌および真菌感染、循環または組織免疫複合体の存在に関連する。
• C4成分は、古典経路の活性化に関与する。その濃度の減少は、免疫複合体による補体の延長された活性化および古典的な補体経路の活性化を制御するC1インヒビターの濃度の低下に関連する。C4欠乏症は全身性エリテマトーデスで起こり、腎臓病、移植拒絶、急性炎症、および胃腸管の疾患でC4の増加が起こる。
• C5aは、補体系の活性化の結果としてそれから分裂したC5分子の小さな断片である。その濃度の上昇は、炎症、敗血症、アトピー性およびアレルギー性疾患で起こる。
• C1-阻害剤は多機能性因子である。それは補体のC1成分の活性化を制御し、カリクレイン、プラスミンおよび活性化因子Hageman、プロテアーゼClsおよびOrの活性を阻害する。C1-インヒビターの欠乏は血管浮腫を引き起こす。
• 相補的な研究。任意の補体成分を欠く標準血清に、試験血清を添加し、補体の溶血活性を測定する。溶血活性が正常に回復しない場合、試験血清中のこの補体成分の活性が低下すると考えられる。

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