細胞移植の限界、危険性および合併症

プラスチック再生医療は、損傷を受けた組織と人間の患者の臓器を再増殖所定の細胞株を作成するために、in vitroおよびin vivoで可能、クリニックやtoti-プロパティ多能性胚性幹細胞および前駆細胞における認識に基づいています。

治療目的のためのヒトの最終組織（いわゆる成体幹細胞）の胚性幹細胞および幹細胞を使用する実際の可能性はもはや疑う余地がない。しかし、米国国立医学アカデミー（米国）の専門家は、実験における幹細胞の特性をより詳細に研究することを推奨している適切な生物学的モデルを用いて、移植のすべての結果を客観的に評価し、その後、幹細胞を診療所で使用する。

幹細胞は、3つ全ての胚葉の組織派生物の一部であることが確立されている。幹細胞は血管において、網膜、角膜、皮膚、表皮、骨髄や末梢血中に発見され、歯の歯髄、腎臓、消化管、膵臓と肝臓の上皮。現代の方法の助けを借りて、幹神経細胞が成人の脳および脊髄に局在することが証明されている。これらのセンセーショナルなデータは、脳のニューロンが回復しない静的な細胞集団の古典的な例として役立ったので、科学者とメディアの特別な注目を集めました。ヒトおよび動物の脳発生したニューロン、アストロサイトおよびオリゴデンドロサイトにおける神経幹細胞による個体発生の初期および後期の期間の両方（幹細胞：健康米国の科学の進歩と今後の研究の方向性ナット研を、...）。

しかし、正常な条件下では、最終組織の幹細胞の可塑性は現れない。最終組織の幹細胞の可塑性を実現するためには、それらを単離し、次にサイトカイン（LIF、EGF、FGF）を含む培地で培養しなければならない。さらに、幹細胞誘導体は、免疫系の低下した動物の体内に移植された場合（γ照射、細胞分裂停止剤、ブスルファンなど）にのみ、正常に生存する。今日まで、照射されていないかまたは深部免疫抑制に曝露されていない動物において、幹細胞の可塑性の確かな証拠は存在していない。

このような状況では、危険な効力のPGCは、主としてそれらの異所性移植領域に現れる - 皮下注射ESK免疫不全マウスに注射部位に形成奇形癌で。さらに、動物における胚発生に比べて染色体異常の人の胚発生頻度中。胚盤胞期のヒト胚のわずか20~25％が、正常な核型を有する細胞で構成され、そしてインビトロでの受精後に得られた初期のヒト胚の圧倒的多数で、染色体モザイクは混沌と非常に頻繁な数値と構造異常を検出しました。

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幹細胞の有益な効果

臨床試験の予備的結果は、患者に対する幹細胞の有益な効果を確認するが、これまでのところ、細胞移植の長期的な結果に関する情報はない。文献では、当初、パーキンソン病における胚の骨髄断片の移植の陽性結果の報告書によって支配が、その後、患者の脳に移植胚または胎児の神経組織の効果的な治療効果を否定したデータを表示されるようになりました。

20世紀の半ばに造血の回復は、最初の骨髄細胞の静脈内輸液後に致死的に照射動物で発見された、そして1969年にアメリカの研究者D.トーマスは最初の骨髄移植の男を行いました。免疫学的な非互換性の骨髄ドナーとレシピエントのメカニズムに関する知識の欠如しばらくは頻繁なneprizhivleniya移植や開発反応「移植片対宿主」に高い死亡率を引き起こしました。ヒト白血球抗原（HBA）、およびかなり広範に腫瘍学および血液中にこの治療方法を導いた骨髄移植後の生存率を増加させることができる、それを入力する方法の改良で構成されている主要組織適合遺伝子複合体の発見。10年後、末梢血から採取した造血幹細胞（HSC）を白血球搬出により最初に移植した。1988年にフランスでのHSCの供給源として、ファンコニー貧血の子供の治療のためには、まず臍帯血を使用し、プレス内で2000年末には、潜在的にその臨床応用の範囲を拡大し、様々な組織タイプの細胞に分化するHSCの能力について、表示されるようになりました。しかし、移植材料は、GSKと一緒に、性質および性質が多様な非造血細胞をかなり多く含むことが判明した。これに関連して、移植片を精製するための方法およびその細胞純度を評価するための基準が開発されている。特に、モノクローナル抗体の助けを借りてHSCを単離することを可能にするCD34 +細胞の陽性免疫切断が使用される。

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幹細胞療法の合併症

骨髄移植の合併症は、血液学的に最も頻繁であり、医原性汎血球減少症の長期間に関連する。最も一般的な感染症は貧血、貧血、出血です。この点において、造血の迅速かつ安定した回復を確実にする幹細胞の最大の保存のための骨髄のサンプリング、処理および貯蔵の最適なモードを選択することは非常に重要である。移植を特徴付ける場合、以下のパラメータ：単核細胞および/または有核細胞の数、コロニー形成単位およびSB34陽性細胞の含有量を評価することが現在受け入れられている。残念なことに、これらの指標は、幹細胞移植個体群の実際の造血能力の間接的な推定値を提供するだけである。現在のところ、でも自家骨髄移植の患者の造血の長期的な回復のための移植片の十分性を決定する絶対的に正確なパラメータがあります。厳格な処理基準、凍結保存および移植片検査の欠如のために、共通基準の開発は極めて困難である。さらに、各特定の患者における造血の成功した回復のパラメーターに影響を与える様々な要因を考慮に入れる必要がある。これらの最も重要な自家骨髄移植に先立って計画の数、特にコンディショニング療法、移植後の期間で刺激因子骨髄収集方式アプリケーションコロニーで産生される疾患の期間です。さらに、胎児移植に先立つ化学療法が骨髄幹細胞に悪影響を及ぼし得ることを忘れてはならない。

同種骨髄移植では重度の毒性合併症の発生率が有意に上昇する。これに関連して、サラセミアにおける同種異系骨髄の移植に関する統計的データが重要である。欧州の骨髄移植グループの報告では、大きなサラセミアの患者に約800件の骨髄移植が記録されています。重篤な合併症と部分的に適合性の関連または関係のないドナーを一致幹細胞物質の移植におけるより高い死亡率と関連しているHLA同一同胞から行うほとんどの場合サラセミアにおける同種移植。致命的な感染性合併症のリスクを最小限に抑えるために、患者は層流の空気を伴う隔離された無菌ボックスに入れられ、低または有害食を受ける。腸の細菌汚染除去のためには、非吸収性の形態の抗生物質、抗真菌薬を処方する。患者を排出する処理を継続しながら、移植前日指定全身感染固定アミカシン及びセフタジジム、静脈内アムホテリシンBを防止することを防止するためです。照射前の全ての血液製剤を30Gyの線量で照射する。移植中の非経口栄養は前提条件であり、食物の摂取を自然に制限することによって直ちに開始されます。

多くの場合、吐き気、嘔吐および粘膜炎、腎障害、間質性肺炎を引き起こす免疫抑制剤の高い毒性に関連する合併症の数。化学療法の最も重篤な合併症の1つは、肝臓の静脈閉塞性疾患であり、移植後早期に死に至る。肝臓の門脈系の静脈血栓症の危険因子のうち、患者の年齢、肝炎及び肝線維症、および骨髄移植後の免疫抑制療法を保持するの存在に留意すべきです。Venookklyuzionnayaの病気は、ヘモジデリン沈着症肝臓線維症及び肝炎を伴うサラセミアにおいて特に危険である - 頻繁な衛星が融像治療をトランス - 。肝臓の門脈系の静脈血栓症は、移植後1〜2週間以内に発症し、血液ビリルビンとトランスアミナーゼの急速な増加、漸進的な肝腫大、腹水、脳症、および上腹部の痛みが特徴です。組織学的剖検材料は、内皮損傷、内皮下出血、病変tsentrolobulyarnyh肝細胞、血栓閉塞肝静脈および中心静脈に定義されています。サラセミア患者では、細胞増殖抑制剤の毒性作用に関連する致命的な心停止の症例が記載されている。

移植の準備において、シクロホスファミドおよびブスルファンは、多くの場合、上皮細胞の病理学的変化を伴う毒性出血性膀胱炎を引き起こす。骨髄移植におけるシクロスポリンAの使用は、しばしば、腎毒性および神経毒性、高血圧症候群、身体内の体液貯留、および肝細胞の細胞溶解の影響を伴う。性的および生殖機能の違反は、女性においてより頻繁に観察される。移植後の幼児では、思春期発達は通常は苦しまないが、高齢の子供では、生殖球の発達の病理は非常に深刻なものになる可能性がある。移植自体に直接関連する合併症には、同種異系骨髄細胞の拒絶、ABO系における不適合性、「移植片対宿主」反応の急性および慢性形態が含まれる。

長期溶血や輸血の必要性の急激な増加につながることができ、移植後330から605日以内に生産移植ABO不適合性骨髄idioagglutininタイプ「ドナーABOに対する宿主」、後の患者の中に。合併症は、赤血球グループのみ0患者数自己免疫性好中球減少症、血小板減少症、汎血球減少症、又は、脾臓摘出を実施しなければならない補正のために移植後の輸血によって防止されます。

急性反応「移植片対宿主」の受信者の35から40パーセントで、同種のヘモグロビン同一骨髄の移植後100日以内に開発しています。皮膚病変、肝臓や腸の程度は発疹、高ビリルビン血症、下痢や軽度の皮膚落屑に、腸閉塞、急性肝不全によって異なります。11から53パーセント - 骨髄移植後のサラセミア周波数急性反応「移植片対宿主」I範囲の患者は75％、IIおよび高い範囲です。全身多臓器不全症候群などの慢性反応「移植片対宿主」とは、通常、患者の30から50パーセントで同種骨髄移植後100から500日以内に開発しています。皮膚、口、肝臓、眼、食道および上気道は影響を受けます。慢性侵攻性肝炎、眼疾患、唾液腺または任意の他の器官に結合した場合の慢性反応「宿主対移植片」場合、影響を受ける皮膚および/または肝臓、および広範囲、一般的な皮膚病変の限定された形を区別する。死因は、しばしば、重篤な免疫不全に起因する感染性の合併症である。3％および重度 - - 反応「宿主対移植片」のサラセミア慢性軽度の形態では中等度、12％で発見されたHLA-互換同種骨髄のレシピエントの0.9％を有します。骨髄移植における重大な合併症は、移植拒絶であり、手術後50-130日に発症する。拒否頻度は調整モードによって異なります。Haziyev等（症例の8％ - 特に、単独メトトレキセートの調製の間に処理されたサラセミアの患者は、骨髄移植片の拒絶は、症例の26％においてシクロスポリンAとメトトレキサートとの組み合わせが観察される - 9％、およびのみシクロスポリンAを割り当てる場合、1995）。

ウイルス、細菌および真菌によって引き起こされる骨髄の移植後の感染性合併症。その開発は、細胞増殖抑制剤は、粘膜障壁と反応「移植片対宿主」を倒すの化学療法コンディショニングの間に誘導された深い好中球減少、が接続されています。開発の時間によっては、感染の3つのフェーズがあります。炎症性およびグラム陰性菌、カンジダ菌 - 最初の段階では（最初の月の移植後に開発）、多くの場合、ウイルス感染症（ヘルペス、エプスタイン - バーウイルス、サイトメガロウイルス、水痘帯状疱疹）、などgrampolozhiによって引き起こされる感染症を伴う、粘膜障壁と好中球減少症への損傷によって支配されています、アスペルギルス属。早期の移植後の期間（第2及び第三ヶ月移植後）には、多くの場合、感染の第2段階で患者の死につながる最も深刻なサイトメガロウイルス感染、です。骨髄の移植後のサラセミアサイトメガロウイルス感染症は、受信者の1.7から4.4パーセントで発生します。第三相は、（三ヶ月動作後）後期移植後期間に観察され、重症複合免疫不全によって特徴付けられます。この期間は、一般的に水痘帯状疱疹、連鎖球菌、肺炎カリーニ、髄膜炎菌、インフルエンザ菌、および肝臓指向性ウイルスによって引き起こされる感染症を発見されました。骨髄移植後の患者におけるサラセミアの死亡率は、細菌や真菌性敗血症、特発性間質性およびサイトメガロウイルス肺炎、急性呼吸窮迫症候群、急性心不全、心タンポナーデ、脳出血、venookklyuzionnoy肝疾患および急性反応「移植片対宿主」と関連しています。

現在、骨髄から幹細胞造血細胞の純粋な集団を単離するための方法の開発において、ある種の進歩がなされている。臍帯から胎児の血液を採取する技術が改善され、臍帯血から血液形成細胞を単離するための方法が開発されている。科学的な報道では、サイトカインを含む培地で培養すると、造血幹細胞が増殖することができるという報告がある。HSCの拡大に特別に設計されたバイオリアクターを使用すると、骨髄、末梢血または臍帯血から単離された幹造血細胞のバイオマスが著しく増加する。HSCの拡大の可能性は、細胞移植の臨床開発において重要な一歩です。

しかし、インビトロでHSCを再生する前に、造血幹細胞の均質な集団を単離することが必要である。これは通常、蛍光標識または磁気標識に共有結合したモノクローナル抗体でHSCを選択的にマーキングし、適切な細胞選別器を用いてそれらを単離することができるマーカーを用いて達成される。同時に、造血幹細胞の表現型特性の問題は最終的には解決されていない。A.ペトレンコ。、GSKの候補は、CD34、AC133及びThyl抗原なしCD38、HLA-DRおよび分化の他のマーカー（表現型CD34 + Liir有する細胞）の表面上に存在する細胞を、処理したとしてV. Hryschenko（2003）。線形分化マーカー（系統、LIN）により（GPA）、CD3、CD4、CD8、CD10、CD14、CD16、CD19、CD20（ミュンヒ、2001）グリコホリンAが挙げられます。移植のための展望は、表現型CD34 + CD45RalwW CD71lowならびにCD34 + Thyl + CD38low / c-kit / lowを有する細胞である。

有効な移植に十分なHSCの数の問題は依然として問題である。現在、幹血液形成細胞の供給源は、骨髄、末梢血および臍帯血ならびに胚性肝臓である。幹造血細胞の増殖は、それらを内皮細胞および造血成長因子の存在下で培養することによって達成される。HSCの増殖を誘導するための異なるプロトコルはmieloproteiny、SCF、エリスロポエチン、インスリン様成長因子、コルチコステロイドおよびエストロゲンを使用しました。サイトカインの組み合わせをインビトロで使用する場合、HSCプールの有意な増加は、培養の第2週の終わりに放出のピークで達成することができる。

伝統的に、HSC臍帯血は、主に血芽細胞腫で使用されている。しかし、臍帯血細胞の移植に成功するために必要な造血細胞の最小用量は、レシピエントの体重1kg当たり3.7×10 ^7個の有核細胞である。より少ない量のHSCを使用することは、移植片の不全および疾患の再発のリスクを有意に増加させる。したがって、臍帯血の血液形成細胞の移植は、主に小児の血栓塞栓症の治療に使用されている。

残念ながら、臍帯血造血細胞の標準的な空白、および標準化されたプロトコル臨床使用はまだありません。したがって自体は臍帯血の細胞が法的に移植のための造血幹細胞の供給源として認識されていない幹。また、海外で利用可能な臍帯krovbの銀行の活動と組織を律する倫理や法律上のルールがありません。一方、臍帯血の移植の安全のために、すべてのサンプルを注意深く監視する必要があります。妊婦の初めに採血する前に、それまで彼女の同意を得なければなりません。各妊娠は、C型肝炎ウイルス、HIV、梅毒に対する抗体、HBsAgのキャリッジに検討されなければなりません。臍帯血の各試料は有核細胞とCD34 +コロニー形成能の標準数で試験されなければなりません。また、HBAはタイピング、血液型ABO及びRh因子のそのメンバシップを行います。試験手順は、HIV-1及びHIV-2感染、HBs抗原、C型肝炎ウイルス、サイトメガロウイルス感染のためNTLY NTLY-1-II、梅毒、トキソプラズマ症を細菌無菌性、血清学的試験で作物を必要としています。また、サイトメガロウイルスおよびHIVポリメラーゼ連鎖反応の検出のために行われます。このようなブルトン、病気Harleraとパンター無ガンマグロブリン血症サラセミアと鎌状赤血球貧血、アデノシンデアミナーゼ欠損症、などの遺伝性疾患を識別するためのプロトコル・テスト臍帯血造血幹細胞の分析を補完するために適切であるように思われます。

移植準備の次の段階で、GSKの保存に関する疑問が生じる。細胞を準備する際の細胞の生存能力にとって最も危険なのは、凍結および解凍の手順です。造血細胞を凍結すると、それらのかなりの部分が結晶形成のために破壊される可能性がある。細胞死の割合を減少させるために、凍結保護物質である特殊物質が使用されています。ほとんどの場合、凍結保護剤としてDMSOが最終濃度10％で使用されます。しかしながら、DMSOについては、この濃度は直接的な細胞傷害作用によって特徴付けられ、最小限の暴露条件下でさえも発現する。中および（複数洗濯手順を適用し、すべての操作の速度）を解凍した後、剛性ゼロ温度露出モード及び規制コンプライアンス処理材料を維持することによって達成低下細胞毒性効果。この場合、凍結期間中に造血細胞の大量死が起こるので、5％未満のDMSO濃度を適用しないでください。

懸濁液混合物GSK中の赤血球不純物の存在は、赤血球抗原に対する不適合反応を生じる危険性を生じる。同時に、赤血球の除去により、造血細胞の損失が有意に増加する。これに関連して、未分画のGSK単離法が提案された。この場合には、細胞懸濁液を液体窒素中で凍結した後、-80℃に低温の損傷効果から有核細胞の10％DMSO溶液を用い、一定速度（HS /分）で冷却を保護します。この凍結保存技術により、赤血球の部分溶解が起こると考えられ、したがって血液試料は分画を必要としない。移植前に、細胞懸濁液を解凍し、ヒトアルブミンまたは血清の溶液中でヘモグロビンおよびDMSOを含まないように洗浄する。この方法を用いて造血前駆細胞の保存は、臍帯血分画後よりも実際に高いが、格納された赤血球のABO不適合輸血の輸血による合併症の危険性。

HSC試験サンプルおよびHSCサンプルの保管のための銀行システムの確立は、上記の問題を解決することができた。しかし、これについては、依然として議論されている倫理的および法的規範を策定する必要があります。銀行ネットワークを構築する前に、GCWのサンプリング、分別、検査、タイピング、および低温保存の手順の標準化に関する多数の規定と文書を採択する必要があります。GSK銀行の効果的な運営のための義務的条件は、世界援助仲介協会（WMDA）と米国国家援助仲介プログラム（NMDP）の登録簿と相互に関連するコンピュータ基盤の組織である。

さらに、主に造血臍帯血細胞であるインビトロでのHSC増殖の方法を最適化および標準化することが必要である。HLAシステムに適合する潜在的なレシピエントの数を増加させるためには、HSC臍帯血の再現が必要である。少量の臍帯血のため、その中に含まれるHSCの量は、原則として、成人患者において骨髄再増殖を提供することができない。同時に、無関係の移植を行うためには、十分な数の典型的なGSKサンプル（1人の受取人あたり10,000〜1,500,000）にアクセスする必要があります。

幹造血細胞の移植は、骨髄移植に伴う合併症を排除するものではない。この分析は、臍帯血幹細胞の移植において、重度の形態の急性「移植片対宿主」反応が23％、慢性の25％のレシピエントに発生することを示している。Oncohematological患者では、HSC臍帯血の移植後1年以内に急性白血病の再発が26％の症例で認められた。

近年、末梢造血幹細胞の移植方法が盛んに開発されている。末梢血中のHSCの含有量は非常に少なく（100,000個の血液細胞につき1 GSKである）、特別な準備なしでの単離は意味をなさない。したがって、ドナーには、以前に造血性骨髄細胞の血液中への放出の薬物刺激のコースが与えられている。この目的のために、シクロホスファミドおよび顆粒球コロニー刺激因子のような非常に無害な薬剤が使用される。しかし、末梢血中のHSCを動員する手順の後でさえ、その中のCD34 +細胞の含有量は1.6％を超えない。

診療所でHSCを動員するために、C-CECがより一般的に使用され、これは骨の痛みのほぼ規則的な出現を除いて、比較的良好な忍容性によって特徴付けられる。現代の血液分離装置の使用は、造血の幹前駆細胞を効率的に単離することを可能にすることに留意すべきである。しかし、造血幹細胞の十分な量を得るために、正常な造血の条件下で、同等の能力repopulyativnoysіl髄スラリーは、少なくとも6つの処置を行う必要があります。そのような各手順では、セパレータは血小板減少症および白血球減少症を引き起こすことができる10-12リットルの血液を処理する。分離手順は、体外遠心分離中の血小板の活性化接触を排除するものではないが、ドナーへの抗凝固剤（クエン酸ナトリウム）の投与を含む。これらの要因は、感染性および出血性合併症の発症のための条件を作り出す。この方法のもう一つの欠点は、最大レベルを決定するために必要な、末梢血液ドナーにおけるHSCの含有量のモニタリングを必要とする動員応答のかなりの変動性にある。

同種異系とは対照的に、HSCの自己移植は、拒絶反応の発生を完全に排除する。それにもかかわらず、徴候のスペクトルをその行為に限定する幹造血細胞の自家移植の重大な欠点は、移植片を有する白血病クローン細胞の再注入の可能性が高いことである。さらに、免疫介在性「移植片対腫瘍」効果の欠如は、悪性血液疾患の再発の頻度を有意に増加させる。したがって、唯一のクローン性造血腫瘍性のラジカル消去の方法および骨髄異形成症候群で、通常のポリクローナル造血を回復するには、同種HSC移植と強力な化学療法です。

しかし、この場合でも、ほとんどの血芽細胞腫の治療は、患者の生存期間を延長し、生活の質を向上させることのみを目的としています。いくつかの大規模な研究によれば、HSC同種移植後の無病生存期間の延長は、温血候学的患者の40％において達成される。HbA適合性兄弟姉妹の幹細胞を使用する場合、病気の病歴が短い若年患者、芽細胞数が最大10％、好ましい細胞遺伝学を有する患者において最良の結果が観察される。残念なことに、骨髄異形成症患者のHSC同種移植の手順に関連する死亡率は高いままである（ほとんどの報告書では約40％）。無病生存期間が2年以内に29％が再発（14％）の比較的低い確率であることを示す - 10年の結果は（38年510人の患者、年齢中央値）を米国の国家プログラムの骨髄寄贈を働きます。しかし、無関係のドナーからのGSC同種移植の手順による死亡率は非常に高く、2年間で54％に達します。同様の結果が欧州の研究で得られた（118人の患者、24才の中央値年齢、2年間の無再発生存率28％、再発率35％、死亡率58％）。

同種造血細胞による造血のその後の回復を伴う化学療法の集中的なコースを行う場合、免疫化学的および輸血の合併症がしばしば生じる。多くの点で、それらは、ヒトの血液型がMHC分子とは独立して遺伝するという事実に関連している。したがって、ドナーおよびレシピエントが主要なHLA抗原と適合性であっても、それらの赤血球は異なる表現型を有し得る。ドナーの赤血球の抗原に対する、レシピエント抗体に「大」不適合ときに以前から存在し、ドナー抗体レシピエントの赤血球の抗原に対する「小」を割り当てます。「大」と「小」の非互換性の組み合わせのケースがあります。

骨髄や血液悪性腫瘍における臍帯血同種移植片の造血幹細胞の臨床効果の比較分析の結果は、子どもの同種移植GSKの臍帯血が大幅に「移植片対宿主」反応の危険性を減少することを示しますが、好中球および血小板の回復の長い期間があります100日間の移植後の死亡率の高い周波数。

初期致死性の原因の研究により、GSKの同種異系移植に対する禁忌を明らかにすることが可能になった。その中で最も重要なのは、

• レシピエントまたはドナーにおけるサイトメガロウイルス感染の陽性検査の存在（予防的処置を行わず）;
• 急性放射線病;
• 患者における真菌感染の存在の存在または疑い（殺菌剤による全身性早期予防なし）;
• （突然の心停止および多臓器不全の高い確率のために）細胞増殖抑制剤で長期の治療を受けたヘモ芽腫。
• HLA非同一ドナーからの移植（シクロスポリンAによる急性「宿主に対する移植」の予防なしで）。
• 慢性ウイルス性肝炎（肝臓の静脈閉塞性疾患を発症するリスクが高いため）。

このように、造血幹細胞移植は、多くの場合、死に至る重篤な合併症を引き起こす可能性があります。期間（最大100日後に移植）の早期では、これらは、同様に起因するコンディショニングレジメンの毒性、組織の損傷に、肝疾患をvenookklyuzionnaya、急性反応「移植片対宿主」、移植拒絶（neprizhivlenie HSCドナー）、感染性合併症を含めた高特性のために改造の割合（皮膚、血管内皮、腸管上皮）。後半移植後の期間の合併症は、「移植片対宿主」基礎疾患の再発、小児の成長遅延、障害、生殖機能や甲状腺眼疾患の慢性反応が含まれます。

最近、骨髄細胞の可塑性に関する刊行物の出現に関連して、心臓発作および他の疾患の治療にGSKを使用するという考えが生じている。動物へのいくつかの実験もこの可能性を支持するが、骨髄細胞の可塑性に関する結論を確認する必要がある。この状況は、ヒト骨髄の移植された細胞が骨格筋、心筋またはCNSの細胞に容易に形質転換されると信じる研究者によって考慮されるべきである。GSKsがこれらの器官の再生の天然の細胞源であるという仮説は、重大な証拠を必要とする。

具体的には、目的のオープン無作為化試験Belenkova V.（2003）、の最初の結果を公表 - C-SISの効果を研究するために（すなわち、自己血造血幹細胞の動員）、重度の慢性心不全への適度な臨床、血行動態及び患者の神経液状態で、だけでなく、標準治療（ACE阻害薬、β遮断薬、利尿薬、強心配糖体）とその安全性評価。研究プログラムの作者の結果の最初の出版物は、O-CBPの賛成で唯一の引数は、この薬による治療中にすべての臨床的および血行動態パラメータにおける議論の余地の改善を発見した一人の患者の治療の結果であることに注意してください。しかし、梗塞後のゾーンにおける心筋の再生に続いて血流への造血幹細胞動員の理論が確認されていない - でも、ドブタミンとストレス心エコー検査の陽性の臨床ダイナミクスの患者では、フィールドの瘢痕領域における生存可能な心筋の出現を明らかにしませんでした。

現時点では、毎日の臨床実践への広範な導入のために代用細胞療法を推奨することができるデータは、明らかに十分ではないことに留意すべきである。再生細胞治療、それに適応および禁忌の開発、ならびに再生プラスチック療法および従来の外科的または保存的治療の併用に関するガイドラインの様々なオプションの有効性を決定するための臨床試験のよく練られたと質的性能。これまでのところ、神経細胞および心筋細胞を生じ、および生体内でこれに貢献どのような条件は明らかではないことができ骨髄細胞（造血幹細胞または間質）の人口の種類の質問への応答がありません。

これらの分野での作業は多くの国で行われています。急性肝不全治療の有望な方法のうち、米国国立衛生研究所のシンポジウムの概要では、肝移植に伴い、移植は、キセノンまたは同種異系の肝細胞をマークし、肝細胞を用いたin vitroバイオリアクター接続インチ 外来の機能的に活性な肝細胞のみが、レシピエントの肝臓を効果的に支持することができるという直接的な証拠がある。単離された肝細胞の臨床的使用のためには、細胞の放出とそれらの使用との間の時間を有意に短縮する細胞バンクを作製することが必要である。単離された肝細胞のバンクを作製するために最も受け入れられるのは、液体窒素中の肝細胞の凍結保存である。このような細胞を急性および慢性肝不全の患者の診療所で使用すると、かなり高い治療効果が明らかになった。

実験や診療所での肝細胞の移植の楽観的かつ有望な結果にもかかわらず、多くの問題が解決されることから遠くまだ残っています。これらは、単離された肝細胞を分離不十分効果的な方法を得るための適切な体の限られた量、肝細胞を移植された細胞の成長および増殖の調節のメカニズムのファジー理解を保存する標準化された方法の欠如を含む、適切な方法の生着の評価又は同種肝細胞の拒絶反応の欠如。これはまた、同種異系または異種の細胞を使用して、移植免疫の存在を含む同所性肝移植の場合よりも少ないが、しかし、単離された肝細胞または特殊処理酵素を封入し、免疫抑制剤の適用を必要とすべきです。肝細胞の移植は、多くの場合、細胞増殖抑制剤の使用を必要とする拒絶反応、レシピエントとドナーの間の免疫紛争につながります。この問題に対する1つの解決策は、宿主免疫にもかかわらず、カプセル膜が効果的に肝細胞を保護するので、それらの生存を改善する肝細胞を単離するためにポリマー微孔性媒体を使用することです。

しかし、急性肝不全などの肝細胞移植であるためステップ最適な機能にアクセスして新しい環境で肝細胞の生着のために必要ではなく、長い時間の効果がありません。潜在的な制限は、単離された肝細胞の胆汁異所性移植の分泌され、そしてバイオリアクターを使用する際に必須の生理学的障壁は、異種肝細胞を産生するヒトタンパク質とタンパク質との間の種の不一致を作用します。

文献では、骨髄間質幹細胞の局所移植、この場合には、効率的な骨欠損の修正、及び骨修復を促進するという報告があるが自発的修復再生よりも集約的です。実験モデルにおけるいくつかの前臨床試験は、骨髄間質骨髄移植を整形外科で使用する可能性を説得力を持って証明しているが、最も簡単な場合でもこれらの技術を最適化するためにさらなる作業が必要である。特に、生体外の間質細胞のエクスビボでの増殖のための最適条件はまだ見出されていないが、それらの理想的な担体（マトリックス）の構造および組成は未処理のままである。バルク骨再生に必要な細胞の最小数は決定されない。

元のセルラインと表現型が無関係な細胞種に分化する能力 - それは、間葉系幹細胞がtransgermalnuyuの可塑性を示すことを証明しました。最適条件下での骨髄穿刺液を1mlから間質細胞の数十億を受信することができる50以上の部門のためにインビトロで維持骨髄間質細胞の多クローン性幹細胞株の培養物。しかし、間葉系幹細胞の集団は、コロニーの大きさの変動として現れる不均一性、細胞型の形成および形態学的多様性の異なる速度によって特徴付け - 線維芽細胞様の紡錘形から大型フラット細胞に。 - 脂肪細胞のクラスター、および他の、より多くの珍しい、軟骨の島を形成する1個のコロニーを、骨組織の結節を形成し、他人ながら：表現型の異質性を観察した培養間質幹細胞の3週間以内。

中枢神経系の変性疾患の治療のために、胚神経組織の移植が最初に用いられた。近年、胚性脳の組織の代わりに、神経幹細胞由来の神経球の細胞が移植されている（Poltavtseva、2001）。ニューロスフェアには、拘束された神経前駆細胞と神経膠細胞が含まれています。これは、移植後の失われた脳機能の回復を望みます。ニューロスフェアへの細胞の移植後に分散したラット線条体の脳の体は、実験gemiparkinsonizmomとラットでのモータの非対称性を解消するドーパミン作動性ニューロンへのそれらの増殖および分化を、マーク。しかしながら、いくつかの場合、腫瘍細胞は神経球の細胞から発生し、動物の死を招いた（Bjorklund、2002）。

患者も医師もないが、患者の一つのグループは、ドーパミンを作る神経細胞と胚組織を移植することを、彼ら（二重盲検）を見て知っていた中で、患者の二つのグループのクリニック慎重な研究は、患者の第2のグループは虚偽のステップを作った、予期しない結果が得られました。胚神経組織を移植した患者は、対照群の患者よりも良い感じませんでした。さらに、全く対照患者のグループがありませんでした胚性神経組織開発持続的運動障害、移植後2年後の33人の患者のうち5（幹細胞：健康米国の科学の進歩と今後の研究の方向性ナット研を、...）。脳の神経幹細胞の臨床研究の未解決の問題の一つは、実際の展望とCNS障害の補正のためのその誘導体移植の制限の分析です。長期の発作活動はてんかんの進行性の発達における因子であり得る、その構造的および機能的変化をもたらす、海馬においてneyronogenezを誘導することが可能です。それは成人の脳における新しいニューロンの生成、および異常なシナプス結合の形成の可能性負の影響を指すように、この結論は、特に注目すべきです。

我々は、無限に分裂する能力を決定することを、それらが細胞周期の調節の変化に近い起こるサイトカイン（マイトジェン）を有する培養培地中では、腫瘍細胞のものに、幹細胞の特性を近似することを忘れてはなりません。この場合、悪性新生物の発症の脅威は非常に大きいので、胚性幹細胞の早期派生物をヒトに移植することは愚かである。よりコミットされた子孫、すなわち分化した系統の前駆細胞を使用する方がずっと安全です。しかしながら、現在、正しい方向に分化している安定なヒト細胞株を得るための信頼性の高い技術は、まだ研究されていない。

幹細胞改変の助けを借りて遺伝病理およびヒト疾患の是正のための分子生物学技術の使用は、実用的な医学にとって大きな関心事である。幹細胞のゲノムの特徴は、遺伝病の矯正を目的とした独自の移植スキームの開発を可能にする。しかし、この方向では、幹細胞の遺伝子工学の実際的な応用が始まる前に、克服する必要がある多くの制限がある。まず、ex vivoでの幹細胞ゲノム改変のプロセスを最適化する必要があります。幹細胞の増殖（3〜4週間）が長引くとトランスフェクションが減少することが知られているため、高いレベルの遺伝子改変を達成するためには数回のトランスフェクションが必要です。しかしながら、主な問題は、治療遺伝子の発現の持続時間に関連する。これまでのところ、いずれの研究においても、改変細胞の移植後の有効発現期間は4ヶ月を超えなかった。経時的な症例の100％において、トランスフェクトされた遺伝子の発現は、プロモーターの不活性化および/または修飾されたゲノムを有する細胞の死滅により低下する。

重要な問題は、医療における細胞技術の使用コストです。例えば、年間50回の移植を行うように設計された骨髄移植部門の医療費のみの推定年間資金需要は約900,000ドルです。

臨床医学における細胞技術の開発は、多分野の科学的および臨床的センターと国際社会の建設的協力を含む複雑かつ多段階のプロセスである。同時に、細胞療法の分野における研究の科学的組織に特別な注意が払われている。これらの中で最も重要なものは、臨床試験のプロトコルの開発、臨床データの有効性の監視、国家研究登録簿の作成、多施設共同治験の国際プログラムへの統合、臨床実践への結果の導入です。

細胞移植の問題への導入を締結、私は科学のさまざまな分野からのウクライナの一流の専門家の共同の努力は、実験や臨床研究に大きな進展を確保し、臓器移植を必要としている重病人を助けるために効果的な方法を見つけるために、今後数年間でできるようになるという希望を表現したいと思います、組織および細胞。

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