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通常、血液中には赤血球に対する抗体は存在しません。
直接クームス試験は、赤血球表面のIgG抗体と補体C3成分を定量する抗グロブリン試験(ゲル凝集法、完全な二価抗体の検出が可能)です。通常、直接クームス試験で検出される抗体は、特定の抗原とは関連がなく、特異性が広いです。直接クームス試験が陽性であれば、患者は溶血性貧血であることを明確に示しますが、直接抗グロブリン試験が陽性の患者全員がこの疾患を患っているわけではありません。約10%の患者では、赤血球膜上の抗体または補体成分が直接クームス試験で検出されない(試験結果が陰性)にもかかわらず、自己免疫性溶血性貧血を患っています。このような場合、抗体の溶出試験を行うことで抗体の特異性を明らかにします。補体のみ陽性となる直接クームス試験は、通常、IgM型の冷抗体に関連しています。この場合、基礎体温では赤血球上にIgM抗体は存在しません。しかし、IgM 抗体は補体を活発に結合し、補体は赤血球上に残るため、この形態の自己免疫性溶血性貧血 (寒冷凝集素症) では、クームス試験は補体に対してのみ陽性となります。
直接クームス試験は、温式抗体による自己免疫性溶血性貧血、自己免疫性薬剤性貧血(メチルドパを服用している患者の最大20%が陽性反応を示す)、薬剤吸着型溶血性貧血、免疫複合体型溶血性貧血(C3のみ陽性)、冷式抗体による自己免疫性溶血性貧血(寒冷凝集素症)(C3のみ陽性)で陽性となる。発作性寒冷血色素尿症では、直接クームス試験は陰性となる。
間接クームス試験 - 間接抗グロブリン試験(不完全抗体を検出)は、赤血球の外来抗原に対する同種抗体を含む血液中の非定型抗体を検出することができます。この試験は2段階で行われるため、「間接」という名前が付けられています。最初に、不完全抗体を含む患者の血清が、目に見える兆候なしに、添加された赤血球診断抗原と相互作用します。第2段階では、添加された抗グロブリン血清が抗原に吸着された不完全抗体と相互作用し、目に見える沈殿物が現れます。同種(同種)赤血球の輸血または妊娠は、これらの抗赤血球抗体の形成の最も一般的な原因です。間接クームス試験が陽性で直接試験が陰性の場合、自己免疫性溶血性貧血の診断には役立ちません。間接クームス試験が陽性の場合、輸血用の血液の選択や保存血液との適合性を調べる交差試験の実施に一定の困難が生じますが、その他の診断上の意義はありません。